低剪切力细胞培养系统是一种专为高敏感性细胞(如干细胞、原代细胞、类器官)设计的生物反应装置,通过优化流体动力学环境,将剪切力控制
在<1 Pa范围内,避免机械损伤,同时确保营养物质和氧气的有效传递。该系统广泛应用于细胞治疗、组织工程和疫苗生产等领域。
一、设备组成
1. 核心培养单元:气升式反应器(无机械搅拌,依靠气泡上升驱动循环)、摇摆式生物反应器(水平摆动,温和混合)、微载体悬浮系统(低转速
搅拌,30-60 rpm)
2. 环境控制模块:
- 溶氧(DO 20%-60%)、pH(7.0-7.4)、温度(37±0.2℃)闭环调控
- 层流供气系统(减少气泡破裂导致的细胞损伤)
3. 监测与自动化:非侵入式光学传感器(pH/DO)、AI驱动的搅拌速度自适应调节
二、工作原理
1. 温和混合机制:
- 气升式:利用上升气泡推动培养基循环(剪切力0.05-0.5 Pa)。
- 摇摆式:通过平台周期性倾斜(5°-10°)产生波浪式流动。
2. 营养/氧气传递:通过微泡通气(直径<200 μm)或膜氧合提高kLa(5-15 h⁻¹)。
3. 细胞保护设计:培养液添加剪切保护剂(如Pluronic F-68)。

三、设计方法
1. 流体力学仿真:CFD模拟优化流场分布,确保最大剪切力<0.8 Pa。
2. 结构优化:圆角罐体设计减少涡流,宽叶轮(D/T=0.4)降低局部剪切。
3. 材料选择:生物相容性涂层(如聚乙二醇化表面)减少细胞吸附。
四、操作流程
1. 系统准备: 反应器灭菌(121℃/20 min),注入无血清培养基(含1% Pluronic F-68)。
2. 细胞接种:干细胞以2×10⁵ cells/mL密度接入,初始搅拌速度30 rpm。
3. 动态培养: 根据细胞密度逐步提升转速(每24小时+10 rpm,上限60 rpm)。
4. 收获:重力沉降或低速离心(200×g,5 min)收集细胞。
五、维护保养
1. 日常维护:每次使用后以0.1M NaOH浸泡1小时,去除蛋白残留。
2. 传感器维护:光学DO传感器每批校准,避免培养基浊度干扰。
3. 长期停用:排空液体,充入氮气保护,每月通电检测控制系统。
