Vero细胞培养反应器是专用于贴壁依赖性Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）大规模扩增的生物反应系统，广泛应用于病毒疫苗（如狂犬病、脊髓灰质炎疫苗）生产该系统通过微载体或

固定床技术提供高比表面积，支持细胞高密度生长，同时满足严格的无菌要求 

一、设备组成 

1. 培养核心单元：搅拌罐（5-1000L，316L不锈钢/玻璃）或固定床反应器 、微载体（如Cytodex-1，直径150-300 μm） 

2. 环境控制模块：温度（37±0.2℃）、pH（7.2±0.1）、溶氧（DO 30-50%）在线调控 、CO₂/O₂混合供气系统 

3. 辅助系统：低剪切搅拌（锚式桨，15-40 rpm）、培养基灌注回路（中空纤维过滤）、CIP/SIP（在线清洗/灭菌）单元 

二、工作原理 

1. 细胞贴附阶段： 微载体预处理（PBS平衡）后接种细胞（2-4×10⁵ cells/mL），静置2-4小时促进贴附 

2. 动态培养阶段：间歇搅拌（5分钟搅拌/30分钟静置）逐步过渡至持续低速搅拌（20-30 rpm） 

3. 病毒增殖阶段：细胞长满载体后接种病毒，降低温度至33-35℃优化病毒复制 

三、设计方法 

1. 载体优化： 选择带正电荷微载体（如DEAE-dextran）增强Vero细胞贴附 

2. 流体力学设计：计算临界悬浮转速（Njs）避免载体沉降（通常Njs=1.5-2×实际转速） 

3. 无菌保障：所有管路采用Tri-clamp快装接口，支持121℃/30分钟SIP 

四、操作流程 

1. 预处理：微载体121℃灭菌20分钟，罐体执行CIP/SIP 

2. 接种培养：接入Vero细胞悬液（含2-5%血清），初始DO>40% 

3. 过程控制：每日检测葡萄糖/乳酸（维持Glc>2 mM，Lac<4 mM）、 灌注培养时控制置换率0.5-1 RV/day 

4. 病毒收获：细胞病变（CPE）达80%时冻融释放病毒，深层过滤澄清 

五、维护保养 

1. 载体处理：使用后微载体用0.1M NaOH浸泡再生（≤3次） 

2. 传感器维护：pH电极每月用pH 4/7缓冲液校准 

3. 系统存储：长期停机需排空培养基，罐体充氮保护